01 1 월
뎅기열 NS1 단백질을 결정하는 데 Thio-NAD 사이클링을 사용한 초고감도 ELISA의 탁월한 장점
1. 소개
뎅기열은 뎅기열로 인해 발생하는 급성 감염병입니다. 뎅기열 바이러스감염된 흰줄숲모기(Ae. aegypti 또는 Ae. albopictus) 모기에 물린 것을 통해, 주요 증상으로는 고열, 현기증, 두통, 발진 등이 있습니다. 아주 심함통증(눈, 근육, 관절 또는 뼈 통증) 등 이 질병은 열대 및 아열대 기후에 널리 퍼져 있습니다. 매년 약 1억에서 4억 명의 사람들이 감염되는 것으로 추산되며, 이 중 80% 이상은 보통 경증 및 무증상입니다. 그럼에도 불구하고 심한 뎅기열은 적절하게 치료하지 않으면 사망 위험을 증가시킬 수 있습니다. 따라서 이 질병의 조기 진단은 적시에 치료하는 데 중요합니다.주목할 만하게도, 고도로 보존된 당단백질인 비구조 단백질 1(NS1)은 주로 감염 중에 분비됩니다. 뎅 그 열 바이러스, 의 주요 발병 인자로 집중적으로 간주됩니다. 뎅기열. 따라서 NSI는 일반적으로 이 질병의 조기 발견을 위한 바이오마커로 사용됩니다.
본 연구에서는 샌드위치 효소 결합 면역흡착 분석법을 연구했습니다.(엘리사)와 함께 THIO 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드(THIO-NAD/S-NAD) 사이클링 방법(이하 초고감도 ELISA라고 합니다.)를 사용하여 NSI를 탐지한 다음 NAAT와 비교하여 탐지 정확도를 확인합니다.
2. 전통적인 검출 방법의 장점과 단점 뎅기열
현재, t다음은 네 가지 주요 감지 방법입니다 때문에 뎅기열.
바이러스 분리 및 식별은 특이도가 높지만 시간이 많이 소요되어 최소 5일이 소요됩니다. 신속 항원 검사는 다른 방법 중에서 가장 빠르고 비용 효율적이지만 민감도와 특이도가 상대적으로 낮습니다. IgM 및 IgG를 기반으로 한 혈청학적 검사는 감염 일수에 따라 제한됩니다. 이 항체 수준이 검출 가능한 수준까지 올라갈 때까지 검사를 연기해야 합니다.
임상에서 NAAT는 종종 다음을 결정하기 위해 적용됩니다. 뎅기열높은 감도와 특이성의 먼지에 의해. 그러나 이 방법은 비용이 많이 들고 힘들며 잘못된 긍정이 발생하기 쉬우므로 훈련된 직원이 수행해야 합니다. 이러한 방법의 단점을 극복하기 위해 새로운 검출 방법 초고감도 ELISA는 이 연구에 적용되었습니다.
3. thio-NAD cycling을 사용한 초고감도 ELISA의 워크플로우
한 쌍의 항체 이다샌드위치 ELISA에 있는 NS1 단백질, 및 알칼리성 phosphatase를 포획하기를 위해 사용해 이다2차 항체에 표시되어 있습니다. 항체는 그렇다 하고, 안드로스테론 유래물, 3α-hydroxysteroid dehydrogenase, thio-NAD 및 NADH 이다thio-NAD 효소 순환 시스템을 구성하는 데 사용됩니다. thio-NAD 사이클링 반응 동안 thio-NADH는 삼각형 숫자 방식으로 지속적으로 축적되었으며 405nm의 흡광도에서 직접 측정할 수 있었습니다.
4. 뎅기열 NS1 단백질 검출에서 초민감 ELISA와 NAAT의 비교
NAAT에서는 60개의 표본이 뎅기열 양성이고 25개의 표본이 뎅기열 음성입니다. 뎅기열 양성 표본의 NAAT 순환 임계값(CT) 값은 12.42에서 31.41 사이였습니다. 초민감도 ELISA에서 59개의 검체는 NAAT 결과에 상응하는 양성인 반면 25개의 검체는 NAAT 결과에 완전히 상응하여 음성입니다.NAAT와 비교하여 초민감성 ELISA의 민감도와 특이도는 각각 98.3%와 100%입니다(표 2). NAAT에서 확인된 뎅기열 양성 환자 검체 60개 중 초민감성 ELISA에서 음성인 검체는 1개에 불과합니다. NAAT 데이터에 따르면 이 검체는 CT 값이 21.59인 4형 DENV 감염 사례입니다. 초민감도 ELISA의 결과는 카파 값이 0.972(95% CI: 0.917)로 NAAT 결과와 거의 완벽하게 일치합니다.-1.0).
5. 결론
초고감도 ELISA 방법은 수행하기 쉽고 전문 교육생이 작동할 필요가 없습니다. 작은 샘플을 받은 직후 감지를 시작할 수 있습니다. 특히 저소득 국가에서 뎅기열병을 조기에 발견하는 데 적합합니다.참조
Chen, Po-Kai et al. "Thio-NAD 사이클링과 함께 초고감도 ELISA를 사용한 뎅기열 NS1 단백질의 고급 검출 방법." 바이러스 vol. 15,9, 1894. 2023년 9월 8일, doi:10.3390/v15091894제품 장점 및 특징 본탁 티오-나드/S-나드
본탁 O입니다에 있는 몇 안 되는 기업 중 ne 중국Thio-NAD를 생산할 수 있습니다.와 "본자임"전체 효소 방법(환경 친화적 인;유해한 용매 잔류물 없음) 및 독특한 "Bonpure" 7단계 정화 기술. BONTAC은 R&D, 생산 및 판매를 통합합니다. 자체 소유 공장 및 다수의 국제 인증을 통해 제품의 고품질과 안정적인 공급을 보장합니다..