01 1월
뎅기열 NS1 단백질 결정에서 Thio-NAD 순환을 통한 초고감도 ELISA의 특별한 장점
1. 소개
뎅기열은 다음과 같은 이유로 발생하는 급성 전염병입니다.뎅기열 바이러스감염된 Aedes 종(Ae. aegypti 또는 Ae. albopictus) 모기에 물려 모기,고열, 현기증, 두통, 발진 및아주 심함통증(눈, 근육, 관절 또는 뼈 통증) 등 이 질병은 열대 및 아열대 기후에서 널리 퍼져 있습니다. 매년 약 100-4억 명이 감염되며, 80% 이상이 일반적으로 경미하고 무증상입니다. 그럼에도 불구하고 심각한 뎅기열은 적절하게 치료하지 않으면 사망 위험을 증가시킬 수 있습니다. 따라서 이 질병의 조기 진단은 시기적절한 치료에 중요합니다.주목할 만하게도, 고도로 보존된 당단백질인 비구조 단백질 1(NS1)은 주로 감염 중에 분비됩니다.뎅 그 열바이러스, 의 주요 발병 인자로 집중적으로 간주됩니다.뎅기열. 따라서 NSI는 일반적으로 이 질병의 조기 발견을 위한 바이오마커로 사용됩니다.
본 연구에서는 샌드위치 효소 결합 면역흡착 분석(엘리사)와 함께티오 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오티드(thio-NAD/S-NAD)사이클링 방식(이하 초고감도 ELISA라고 함)을 사용하여 NSI를 감지한 다음 NAAT와 비교하여 감지 정확도를 확인합니다.
2. 기존 감지 방법의 장점과 단점뎅기열
현재 t다음은 네 가지 주요 감지 방법입니다때문에 뎅기열.
바이러스 분리 및 식별은 특이성이 높지만 시간이 많이 걸리고 최소 5일이 소요됩니다. 신속항원검사는 다른 방법 중에서 가장 빠르고 비용 효율적이지만 민감도와 특이도는 상대적으로 낮습니다. IgM 및 IgG를 기반으로 한 혈청학적 검사는 다음과 같이 감염 일수에 의해 제한됩니다.이항체 수치가 검출 가능한 수준으로 상승할 때까지 검사를 지연해야 합니다.
임상에서는 NAAT를 결정하기 위해 종종 적용됩니다.뎅기열높은 감도와 특이성의 먼지에 의해. 그러나 이 방법은 비용이 많이 들고 힘들며 위양성이 발생하기 쉬우므로 숙련된 직원이 수행해야 합니다.이러한 방법의 단점을 극복하기 위해 새로운 감지 방법초고감도 ELISA는 이 연구에 적용되었습니다.
3. thio-NAD 사이클링을 통한 초고감도 ELISA의 워크플로우
한 쌍의 항체입니다.샌드위치 ELISA에서 NS1 단백질을 포획하는 데 사용되며 알칼리성 포스파타제는입니다.2차 항체에 표지되어 있습니다. 항체 외에도 안드로스테론 유도체, 3α-하이드록시스테로이드 탈수소효소, 티오-NAD 및 NADH이다티오-NAD 효소 순환 시스템을 구성하는 데 사용됩니다. 티오-NAD 사이클링 반응 동안 티오-NADH는 삼각형 방식으로 지속적으로 축적되었으며 405nm의 흡광도에서 직접 측정할 수 있었습니다.
4. 뎅기열 NS1 단백질 검출에서 초고감도 ELISA와 NAAT의 비교
NAAT에서는 60개의 검체가 뎅기열 양성이고 25개의 검체가 뎅기열 음성입니다. 뎅기열 양성 검체의 NAAT 순환 역치(CT) 값은 12.42에서 31.41 사이였습니다.초고감도 ELISA에서 59개의 검체는 NAAT 결과에 따라 양성인 반면 25개의 검체는 NAAT 결과에 대해 완전히 음성입니다.NAAT와 비교하여 초고감도 ELISA의 민감도와 특이도는 각각 98.3%와 100%입니다(표 2). NAAT에서 확인된 뎅기열 양성 환자 표본 60개 중 초민감도 ELISA에서 음성인 검체는 1개뿐입니다. NAAT 데이터에 따르면 검체는 CT 값이 21.59인 4형 DENV 감염 사례입니다. 초고감도 ELISA의 결과는 NAAT 결과와 거의 완벽하게 일치하며 카파 값은 0.972(95% CI: 0.917-1.0).
5. 결론
초고감도 ELISA 방법은 수행하기 쉽고 전문 연수생이 필요하지 않습니다. 작은 샘플을 받은 후 즉시 감지를 시작할 수 있습니다. 저소득 국가에서 뎅기열 질병의 조기 발견에 특히 적합합니다.참조
Chen, Po-Kai et al. "Thio-NAD 사이클링과 함께 초고감도 ELISA를 사용한 뎅기열 NS1 단백질에 대한 고급 검출 방법." 바이러스 vol. 15,9 1894. 2023년 9월 8일, doi:10.3390/v15091894제품의 장점과 특징BONTAC 티오-NAD/S-NAD
본택 o몇 안 되는 기업 중 하나중국Thio-NAD를 생산할 수 있는와"본자임"전체 효소 방법(환경 친화적 인;유해한 용매 잔류물 없음) 및 독특한 "Bonpure" 7단계 정화 기술. BONTAC은 R&D, 생산 및 판매를 통합합니다. 자체 소유 공장 및 다수의 국제 인증을 통해 제품의 고품질과 안정적인 공급을 보장합니다..