뎅기열 NS1 단백질 결정에 있어 티오-NAD 순환을 이용한 초민감 ELISA의 탁월한 장점
1. 서론
뎅기열은뎅기열 바이러스 감염된 이데스 모기(Ae. aegypti 또는 Ae. albopictus)의 물림을 통해,주요 증상으로는 고열, 어지러움, 두통, 발진이 있습니다.심각해 통증(눈, 근육, 관절, 뼈 통증) 등. 이 질병은 열대 및 아열대 기후에서 널리 퍼져 있습니다. 매년 약 1억에서 4억 명이 감염되며, 이 중 80% 이상이 보통 경미하고 무증상입니다. 그럼에도 불구하고, 중증 뎅기열은 적절히 치료하지 않으면 사망 위험을 높일 수 있습니다. 따라서 이 질병의 조기 진단은 적시에 치료하는 데 매우 중요합니다.주목할 점은, 매우 보존된 당단백질인 비구조 단백질 1(NS1)이 주로 감염 중에 분비된다는 것입니다.뎅기열바이러스, 이는 주요 발병 인자로 집중적으로 간주됩니다.뎅기열. 따라서 NSI는 이 질병의 조기 발견을 위한 바이오마커로 일반적으로 사용됩니다.
본 연구에서는 샌드위치 효소 결합 면역흡착 분석법을 사용했습니다 (엘리사) 와 함께티오 니코틴아미드 아데닌 디뉴클레오타이드 (티오-NAD/S-NAD)사이클링 방법 (이후로 초민감성 ELISA라고 부릅니다이 데이터를 사용해 NSI를 탐지한 후, NAAT와 비교하여 그 탐지 정확도를 확인합니다.
2. 전통적 검출 방법의 장단점뎅기열
현재 t는다음은 네 가지 주요 탐지 방법입니다에 대해 뎅기열.
바이러스 분리 식별은 특이성이 높지만 시간이 많이 걸려 최소 5일이 소요됩니다. 그 신속 항원 다른 방법 중 가장 빠르고 비용 효율적인 검사지만, 감도는 그리고 특이성도 상대적으로 낮습니다. IgM과 IgG를 기반으로 한 혈청학적 검사는 다음과 같이 제한됩니다. 감염일수 수는 다음과 같다그항체 수치가 올 때까지 검사를 지연해야 합니다 감지 가능한 수준으로 올라갑니다.
임상에서는 NAAT가 종종 적용되어 판단합니다뎅기열 높은 감도와 특이성에 의해. 하지만 이 방법은 비용이 많이 들고 노동이 많이 들며, 잘못된 긍정주의가 생기기 쉽기 때문에 훈련된 인력이 반드시 수행해야 합니다.이러한 방법들의 단점을 극복하기 위해 새로운 탐지 방법이 도입되었습니다초민감 ELISA는 이 연구에 적용되었습니다.
3. 티오-NAD 사이클링을 이용한 초민감 ELISA 워크플로우
항체 두 개이야. 샌드위치 내 NS1 단백질을 포획하는 데 사용되며, ELISA와 알칼리성 인산효소이야. 2차 항체에 표기되어 있습니다. 항체 외에도 안드로스테론 유도체인 3α-하이드록시스테로이드 탈수소효소, 티오-NAD, NADH가 있습니다are 이 시스템은 티오-NAD 효소 순환 시스템을 구축하는 데 사용되었습니다. 티오-NAD 사이클링 반응 동안 티오-NADH는 삼각형 숫자 형태로 지속적으로 축적되었으며, 405 nm의 흡광도에서 직접 측정할 수 있었습니다.
4. 뎅기열 NS1 단백질 검출에서 초민감 ELISA와 NAAT의 비교
NAAT에서는 60개의 표본이 뎅기열 양성, 25개의 뎅기열 음성입니다. 뎅기열 양성 표본의 NAAT 사이클링 임계값(CT) 값은 12.42에서 31.41 사이였습니다.초민감도 ELISA에서는 59개의 표본이 NAAT 결과에 대응하는 양성이고, 25개의 표본이 완전히 음성 반응을 보입니다.NAAT와 비교했을 때, 초민감 ELISA의 민감도와 특이도는 각각 98.3%와 100%입니다(표 2). NAAT 확인 뎅기열 양성 환자 60명 중 초민감 ELISA에서 음성인 표본은 단 1명뿐입니다. NAAT 데이터에 따르면 이 표본은 CT 값 21.59의 제4형 DENV 감염 사례로 나타났습니다. 초민감 ELISA의 결과는 NAAT 결과와 거의 완벽하게 일치하며, 카파 수치는 0.972(95% 신뢰구간: 0.917-1.0).
5. 결론
Ultrasensitive ELISA 방법은 수행이 쉽고 전문 연수생이 필요 없어. T소량 샘플을 받은 즉시 검출을 시작할 수 있습니다. 특히 조기 탐지에 적합합니다.뎅기열질병 저소득 국가.참고문헌
Chen, Po-Kai 외. "티오-NAD 순환을 이용한 초민감 ELISA를 이용한 뎅기열 NS1 단백질의 첨단 검출 방법." 바이러스 15권, 9권 1894년. 2023년 9월 8일, doi:10.3390/v15091894제품의 장점과 특징본탁 티오-나드/S-나드
본탁 오몇 안 되는 기업 중 북쪽중국 이 방법은 티오-NAD를 생성할 수 있습니다, 와"본자임" 전효소 방법 (친환경; 유해 용매 잔류물이 없습니다) 독특한 '본퓨어' 7단계 정화 기술. BONTAC은 연구개발, 생산, 판매를 통합하여 자주 공장과 여러 국제 인증을 통해 제품의 품질과 안정적인 공급을 보장합니다.
